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层析喷雾器-层析仪使用

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如何用纸层析法对氨基酸进行定性和定量的测定

1、在滤纸条上端边缘约1厘米的中央剪一小孔。将滤纸条平放于洁净的纸上,在距离滤纸下端25px处用铅笔轻画一横线,并在横线的中央画一直径为2mm的小圆圈。用毛细管吸取氨基酸混合液,在滤纸条下端的小圆圈内点样。

2、纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相。

层析喷雾器-层析仪使用
(图片来源网络,侵删)

3、实验原理:纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。

4、用铅笔划下层析斑点,可进行定性、定量测定。 (2)混合氨基酸双向上行纸层析法 滤纸准备 将滤纸裁成约28cm2的正方形,在距滤纸相邻两边各2cm 处的交点上,用铅笔划下一点,做为原点。 点样 取混合氨基酸溶液(5mg/mL)10~15μL,分别点在原点上。

5、纸层析法(paPer ChromaograPhy)通常用于蛋白质的氨基酸成分定性和定量,1944年A.亅.p.马丁第一次用纸层析法分析氨基酸,得到很好的分离效果。到现在为止,纸层析法已经成为是性或定量测定多肽,核酸碱基,糖,有机酸,维生素,抗生素等物质的一种最简单易行的分离分析工具

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6、实验器具:层析纸,层析缸,我们那会好像是要两条细线把有的层析缸好的也不用。微量注射器 2过程:(1)层析纸的方向要纵向条纹放置,然后在横向上化一条距底边1厘米的横线。

纸层析实验的实验步骤及现象

展开剂的选择 选择合适的展开剂是纸层析成功的关键之一。展开剂的性质需与待分离物质在固定相(通常是滤纸中的水分)中的相互作用力相匹配。对于苏丹红这类油溶性色素,常用的展开剂可能是正己烷与乙醇或其他极性较弱的溶剂的混合物,比例需通过试验确定,以获得良好的分离效果。

⑶把插好的滤纸芯的滤纸放在有正丁醇-氨水的混合液的培养皿上,使纸芯浸入混合液。随着液体的渗吸,滤纸中心的***样点痕迹向外逐渐扩大,成为黄环。⑷待黄环半径扩展至滤纸半径的二分之一时,取下滤纸,拔下纸芯。等滤纸稍干后,喷上饱和的碳酸钠溶液,于是在甲基橙外面出现了一个酚酞的红环。

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在滤纸条上端边缘约1厘米的中央剪一小孔。将滤纸条平放于洁净的纸上,在距离滤纸下端25px处用铅笔轻画一横线,并在横线的中央画一直径为2mm的小圆圈。用毛细管吸取氨基酸混合液,在滤纸条下端的小圆圈内点样。

实验操作:取层析滤纸(20×2cm)一条,在纸的一端距边缘3cm处用铅笔划一直线,取其中点作为原点。在大试管中加入适当的扩展剂,使扩展剂的液面处于悬挂在橡皮塞上的层析滤纸的原点到底端的中间。点样:用毛细管将氨基酸混合液点在原点上,用吹风机吹干,干后再点一次。

纸层析实验的实验步骤及现象氨基酸的纸层析 实验目的 了解并掌握氨基酸纸层析的原理和方法。 学习纸层析法的操作技术,分析未知样品氨基酸的成分。

④ 制备待测样品——将菌种37℃ 培养24h后离心,收集上清液 ⑤ 点样——用毛细管分别吸取发酵液,多次点样于滤纸条上,样点直径不宜超过2mm,平衡2h ⑥ 层析——将点好样的层析纸放入,使点有样品的一端浸在展开剂中,但不可浸及样点。

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纸层析法分离氨基酸实验中展层时间的长短对结果有什么影响

和被测物质极性、展开剂极性有关,也和固相吸附剂的吸附能力、洗脱剂的洗脱能力有关。做此实验时,有如***意点。层析液放入适量,标准是保持层析过程既不挥发完(因此层析过程最好盖住),也不没刻线。

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法,其中滤纸纤维素上吸附的水是固定相,展层用的有机溶溶剂是流动相。

在纸色谱法鉴定氨基酸实验中有足够的展开时间原因如下:足够的时间能更区分出各氨基酸流动路程的不同。展开时间时纸色谱法鉴定氨基酸实验不能完成。氨基酸的纸色谱实验氨基酸实验是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。

流动相的流速控制、层析缸的密封等。这些细节都会影响实验结果和分离效果。综上所述,氨基酸纸层析中固定相是涂布或浸润了展层剂的滤纸,流动相是混合有机溶剂。实验成功的关键在于选择合适的展层剂、滤纸和处理方法,以及正确的流动相选择和配制。同时,掌握正确的操作技巧和注意事项也是非常重要的。

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