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气溶胶喷雾器噬菌体-气溶胶喷雾法消毒

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噬菌体滴度的测定方法?

操作步骤 在5~10ml LB培养基中接种单个ER2537克隆,振摇孵育直至对数生长中期(OD600~0.5) 在细胞生长时,微波融化顶层琼脂糖凝胶,分装至无菌培养管内,每管3ml。维持在45℃备用。 37℃预热LB/IPTG/Xgal培养板,备用。 以LB培养基10倍比稀释噬菌体。

按10倍稀释法,吸取0.5mL大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体,注入一支装有5mL1%蛋白胨水的试管中,即稀释到10-1,依次稀释到10-6稀释度。3 噬菌体与菌液混合 将11支灭菌空试管分别标记10-10-10-6和对照。

气溶胶喷雾器噬菌体-气溶胶喷雾法消毒
(图片来源网络,侵删)

在免疫学中,滴度更是关键概念,它指的是通过血清学方法能引发一定反应的抗体或抗血清的最高稀释倍数。例如,如果终点稀释度为1/100,意味着每1毫升血清中含有100抗体单位的抗体效价。最后,在病毒学领域,噬菌体的滴度(或效价)是指一毫升培养液中活噬菌体的数量,这是通过噬菌斑方法来测定的。

所以,用蓝斑来显示噬菌体感染与否要更准确。注意:只有当噬菌体的感染复度MOI (multiplicity of infection)值远低于1 时(即细胞过量时),噬菌斑的数量才会随着加入噬菌体的量而呈线性增加。满足上述条件,计数不同浓度梯度下的蓝斑数,就可计算噬菌体滴度。

在***学中,指用噬菌斑方法测得的噬菌体浓度。噬菌体的效价(滴度)就是一毫升培养液中所含活噬菌体的数量。

气溶胶喷雾器噬菌体-气溶胶喷雾法消毒
(图片来源网络,侵删)

一个噬菌斑一定是由一个噬菌体侵染周围宿主形成的吗?

1、有可能出现同一个噬菌斑,所以***用活体计数时,所得数值是偏小的。也就是说,肉眼看到的一个噬菌斑有可能是一个或多个噬菌体共同形成的。

2、噬菌斑是噬菌体感染敏感宿主细菌以后在含受体菌的涂布平板上形成的肉眼可见的透明圈。

3、由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”叫噬菌斑,空斑与动物***有关。噬菌斑与噬菌体有关系,由噬菌体在菌苔上形成的“负菌落”叫噬菌斑;由动物***在宿主单层细胞培养物上形成的叫空斑。

气溶胶喷雾器噬菌体-气溶胶喷雾法消毒
(图片来源网络,侵删)

空气微生物***样研究的方法~

固体撞击式***样法对悬浮于空气中小颗粒微生物捕获率高于沉降法,并能较准确地表达出空气中细菌的实际含量,是一种较理想的的***样方法。

自然沉降法是一种***样方法,它利用空气微生物粒子的重力作用,在一定时间内,使空气中的微生物颗粒沉降到含有培养介质的平皿内。尽管自然沉降法较为粗糙,不能测定空气流量和悬浮的小粒子上的细菌,但它对于检测因微生物粒子沉降而导致的污染,如伤口污染,仍然具有一定的价值。

常用的空气微生物***样方法有四种:沉降法、固体撞击法、液体撞击法、滤过法。

自然沉降法。它是利用空气微生物粒子的重力作用,在一定的时间内,让所处区域的空气中微生物颗粒逐步沉降到带有培养介质的平皿内的一种***样方法。自然沉降法粗糙,不能测定空气流量和悬浮在空气中的小粒子上的细菌,但对于那些因菌粒子沉着而致的污染,例如伤口的污染仍有一定的价值。

空气培养的***样方法如下:使用培养基,向培养瓶中加入待培养物质,如菌落、细胞或培养基液。用专用空气瓶将加入培养基后的培养物进行填充,以减少氧气的损失,并保持培养瓶内含氧量在设定值以内。

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